本试剂盒仅限于科学研究使用,不可用于医学诊断。犬传染性肝炎病毒(ICHV)Elisa试剂盒的使用说明书如下:
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被的adropin(AD)抗体微孔中,依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,随后进行温育和彻底洗涤。使用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶催化下转化为蓝色,在酸性条件下进一步转化为黄色。最终颜色的深浅与样品中adropin(AD)的含量成正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),从而计算样本浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用无热原和内毒素的试管,操作时避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟,迅速分离血清和红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝后,3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:通过3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合搅拌,3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:若样本未能及时检测,建议按单次用量分装,存放于-20℃冷冻,避免反复冻融,解冻时务必确保样品充分均匀解冻。
操作注意事项
试剂盒的组成中,标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备和洗板方法
20×洗涤缓冲液需按1:20比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液与19份蒸馏水混合。
结果判断
在Excel中绘制标准曲线,以标准品浓度为横坐标,对应OD值为纵坐标,生成标准品线性回归曲线,并根据曲线方程计算各样本的浓度值。
免责声明
本试剂盒的性能经严格测试,但不保证适用于所有实验条件。在使用过程中,请遵循所有操作步骤并注意安全。
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