1. 实时荧光定量PCR的定义
实时荧光定量PCR(Real-time PCR)是一种通过实时监测荧光信号的积累过程,从而对PCR反应进行实时分析的方法。最终,通过CT值与标准曲线,可以对未知模板的量进行准确的定量分析。
2. 实时荧光定量PCR的原理
A. 化学原理:该方法通过将产物DNA分子转化为荧光信号,荧光值的测定可以反映出产物DNA的分子量。
B. 数学原理:通过Cycle Number(CT值)计算起始DNA的量。
4. 实时荧光定量PCR的优势
在比较不同样本中某基因的“量”上,实时荧光定量PCR展现出诸多优势:
(1) 能够实时监测PCR反应的进程;
(2) 检测范围更为广泛,可以对样本中起始量进行精准的定量;
(3) 在单管中同时实现扩增与检测,省去PCR后处理的步骤。
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