尊龙凯时猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒（实时荧光PCR法）使用说明书

产品信息

产品名称：猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒（实时荧光PCR法）

英文名称：Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)

包装规格：50T/盒

预期用途

本试剂盒基于实时荧光PCR原理，能够定性检测猪蓝耳病病毒，对该病的诊断及疗效评估提供重要指导。

原理

本试剂盒通过特异性引物和探针设计，针对猪蓝耳病病毒的高度保守区域。在包含病毒基因组模板的反应体系中，PCR反应进行并释放荧光信号。通过荧光定量PCR仪实时监测和输出信号，实现对结果的定性分析。

试剂盒组成

本试剂盒包括以下组成：

1. PRRSV RT-PCR反应液：875 μL × 1管
2. PRRSV混合酶液：125 μL × 1管
3. PRRSV阳性对照：40 μL × 1管
4. PRRSV阴性对照：40 μL × 1管
5. 说明书：1份

注：阴性对照为灭菌纯水，阳性对照为含猪蓝耳靶基因的质粒。

储存条件及有效期

本试剂盒应避光存放，最佳储存温度为-20℃以下，避免反复冻融，保质期为12个月。

适用仪器

该试剂盒适用于ABI系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列、杭州博日系列等多通道实时荧光定量PCR仪。

样本要求

样本类型包括：

1. 血液或血清样品：使用无菌注射器抽取样本，放置于离心管中。
2. 肺脏、淋巴结和脾脏样品：取20g样本，用无菌PBS研磨成乳剂，进行离心处理。
3. 注意避免样本间的交叉污染。
4. 样本收集后可立即检测，如不能及时检测，可在2～8℃冷藏保存，长期保存应在-80℃以下冻存。

检验方法

1.试剂准备

从试剂盒中取出所需试剂，充分融化并离心去除管壁附着液体。根据实验需求计算反应所需的试剂量，并在无菌离心管中混合后分装至PCR反应管。

2.样本准备

采用QIAGEN或Roche RNA提取试剂盒提取RNA，按照说明书操作进行。

3.加样

将处理好的RNA样本各5μL加入PCR反应管中，并加盖混匀；阳性和阴性对照管同样处理。

4.PCR扩增

将PCR反应管放置于实时荧光定量PCR仪中，设置扩增参数并执行PCR扩增。

检验结果的解释

根据荧光信号，阳性表示样本中检出猪蓝耳病病毒，阴性则表示未检出。

注意事项

使用尊龙凯时试剂盒的实验室应遵循相关基因扩增实验室管理规范，样本处理应谨慎以防RNA降解，确保实验环境的洁净和设备的正确设置。

产品性能指标

该试剂盒的最低检出限为103 Copies/mL，CV值≤3%。

通过使用尊龙凯时的产品，确保实验结果的准确性和可靠性，为猪蓝耳病的早期诊断和防控提供强有力的支持。