尊龙凯时猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒(实时荧光PCR法)使用说明书
产品信息
产品名称:猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒(实时荧光PCR法)
英文名称:Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)
包装规格:50T/盒
预期用途
本试剂盒基于实时荧光PCR原理,能够定性检测猪蓝耳病病毒,对该病的诊断及疗效评估提供重要指导。
原理
本试剂盒通过特异性引物和探针设计,针对猪蓝耳病病毒的高度保守区域。在包含病毒基因组模板的反应体系中,PCR反应进行并释放荧光信号。通过荧光定量PCR仪实时监测和输出信号,实现对结果的定性分析。
试剂盒组成
本试剂盒包括以下组成:
- PRRSV RT-PCR反应液:875 μL × 1管
- PRRSV混合酶液:125 μL × 1管
- PRRSV阳性对照:40 μL × 1管
- PRRSV阴性对照:40 μL × 1管
- 说明书:1份
注:阴性对照为灭菌纯水,阳性对照为含猪蓝耳靶基因的质粒。
储存条件及有效期
本试剂盒应避光存放,最佳储存温度为-20℃以下,避免反复冻融,保质期为12个月。
适用仪器
该试剂盒适用于ABI系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列、杭州博日系列等多通道实时荧光定量PCR仪。
样本要求
样本类型包括:
- 血液或血清样品:使用无菌注射器抽取样本,放置于离心管中。
- 肺脏、淋巴结和脾脏样品:取20g样本,用无菌PBS研磨成乳剂,进行离心处理。
- 注意避免样本间的交叉污染。
- 样本收集后可立即检测,如不能及时检测,可在2~8℃冷藏保存,长期保存应在-80℃以下冻存。
检验方法
1.试剂准备
从试剂盒中取出所需试剂,充分融化并离心去除管壁附着液体。根据实验需求计算反应所需的试剂量,并在无菌离心管中混合后分装至PCR反应管。
2.样本准备
采用QIAGEN或Roche RNA提取试剂盒提取RNA,按照说明书操作进行。
3.加样
将处理好的RNA样本各5μL加入PCR反应管中,并加盖混匀;阳性和阴性对照管同样处理。
4.PCR扩增
将PCR反应管放置于实时荧光定量PCR仪中,设置扩增参数并执行PCR扩增。
检验结果的解释
根据荧光信号,阳性表示样本中检出猪蓝耳病病毒,阴性则表示未检出。
注意事项
使用尊龙凯时试剂盒的实验室应遵循相关基因扩增实验室管理规范,样本处理应谨慎以防RNA降解,确保实验环境的洁净和设备的正确设置。
产品性能指标
该试剂盒的最低检出限为103 Copies/mL,CV值≤3%。
通过使用尊龙凯时的产品,确保实验结果的准确性和可靠性,为猪蓝耳病的早期诊断和防控提供强有力的支持。