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尊龙凯时小鼠胚胎成纤维细胞培养处理优化

发布时间:2025-02-09   信息来源:尊龙凯时官方编辑

在收到3T6-Swissalbino小鼠胚胎成纤维细胞后,我们需要进行一系列标准操作,以确保细胞能够在实验室环境中稳定生长,为后续的科学研究打下坚实基础。

尊龙凯时小鼠胚胎成纤维细胞培养处理优化

细胞接收与初步处理

1)收到细胞后,首先应检查培养瓶是否完好,确保没有缝隙或裂痕。
2)使用显微镜观察细胞的生长状态,检查是否有细胞漂浮现象。
3)使用新洁尔灭对瓶口及瓶身进行消毒处理。

液体处理与细胞适应

4)打开瓶口后,再次用新洁尔灭进行消毒,以防止液体溢出时造成的污染,同时使用酒精灯对瓶口进行消毒。
5)将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中。如果发现细胞漂浮严重,则需进行离心处理,以1000g的速度离心5分钟,并将离心后的上清液转移至另一个大离心管中。此时需留下一定量的沉淀液,以便轻轻吹打形成细胞悬液,最后再回收细胞至原培养瓶中。如果漂浮现象不严重,也可进行适度离心。
6)在原培养瓶中留存一部分原装培养液,同时补加4ml新配制的培养基,以帮助细胞适应新的环境。

细胞传代与冻存

当细胞生长达到70-80%时,可以进行冻存和传代处理。
7)待细胞适应新环境24-48小时后,再次使用显微镜检查细胞生长状态。如果细胞贴壁良好、形态饱满且无明显漂浮或死亡现象,则可进行后续操作。
8)在进行细胞传代时,应轻轻晃动培养瓶,使贴壁细胞松动,然后用吸管轻轻吹打细胞以形成均匀的细胞悬液。根据1:3或1:4的比例,将细胞悬液分装至新的培养瓶中,并补充适量新鲜培养基。

细胞冻存操作

9)对于需要冻存的细胞,选择适合的冻存液(通常含有血清和DMSO等),按照一定比例将细胞悬液与冻存液混合,然后装入冻存管中。遵循慢冻原则,先将冻存管放置于4℃冰箱中30分钟,再移至-20℃冰箱中2小时,最后转入-80℃冰箱或液氮中进行长期保存。

培养过程中的注意事项

10)在整个培养过程中,定期更换培养基以维持细胞的营养供应和生长环境是至关重要的。同时,要严格遵循无菌操作,确保避免细胞污染。通过以上细致的操作步骤,借助尊龙凯时的优质品牌支持,3T6-Swissalbino小鼠胚胎成纤维细胞将在实验室中稳定生长,为科学研究提供坚实的基础。